产品优势
省时:比亲和凝胶法节省大约80min(以IP实验为例比较);
操作简单:磁性分离,无需离心;
非特异低:亲和凝胶孔径大,容易产生非特异吸附,而磁珠孔径小,不容易产生非特异吸附;
结合量高:磁珠表面PorteinA/G的蛋白包被量高达9.3×1013个分子/平方厘米, 抗体加载量为0.4-0.5 mg/mL磁珠悬液。

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价格对比

产品描述
Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术”(S-TEC),Protein A/G包被在超顺磁性磁珠微球表面, 包被密度高达9.3×1013个分子/平方厘米。与同类产品相比,Bimake Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗体结合位点。在IP实验中,只需使用更少的磁珠量,非特异性结合低,使用简便有效。Bimake Protein A/G免疫沉淀磁珠具有大面积特异的表面区域,从而大大缩短抗体吸附和抗原结合的时间。最短时,抗原和抗体的结合时间只需10分钟,可以在30分钟内完成完整的IP实验。Bimake Protein A/G免疫沉淀磁珠适用的范围广泛,例如细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它的免疫抗原等。
特性
Protein A/G是融合了Protein A和Protein G蛋白的IgG结合区的重组融合蛋白,它包含了Protein A的四个Fc结合区域以及Protein G的两个Fc结合区域,分子量50460 Da。相比Protein A,Protein A/G的结合更少依赖pH值,但是却具有了Protein A和G两者的加合效应。
产品性质
浓度 | 10 mg/mL |
磁珠大小 | 100 nm |
人IgG结合能力 | 0.4-0.5 mg/mL |
配体 | 重组蛋白A/G |
应用 | rProtein纯化,免疫沉淀 |
pH稳定性 | 6-8 (长期) |
运输条件 | 蓝冰 |
储存条件
4°C可以储存2年。在缺乏甘油的情况下避免反复冻融。
实验方法
图1展示了免疫共沉淀(IP)的操作方法。可以根据抗体类型和靶蛋白进行进一步的优化。Protein A/G免疫磁珠是进行IP实验的最佳方案。

表1 免疫共沉淀(IP)的操作方法
推荐的缓冲液配方
表2. 推荐的缓冲液配方 缓冲液 | 推荐配方(自备) |
---|
Binding buffer | 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent (TritonX-100, Tween 20 or NP40), pH 7.5 |
Wash buffer | 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent, pH 7.5 |
Elution buffer | 0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1 (or 0.1 M citric acid, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1) |
Neutralize buffer | 1 M Tris, pH8.0 |
实验之前的注意事项
1 进行IP实验之前,请仔细阅读操作说明;
2 该产品需要使用磁力架
3 使用之前,请将Protein A/G免疫磁珠混匀;
4 Protein A/G免疫磁珠应该保持在储存液中避免干掉;
5 Protein A/G免疫磁珠应避免冻融或离心;
6 为保证最佳结果,请选择特异性好的抗体;
7 根据不同的抗体和抗原仅进行实验方法的优化;
表1. 抗体与Protein A/G及Protein A的结合能力比较 Species | Antibody class | sProtein A/G | sProtein A |
---|
Human | Total IgG | +++++ | +++++ |
IgG1, IgG2 | +++++ | +++++ |
IgG3 | +++++ | + |
IgG4 | +++++ | +++++ |
IgM | + | + |
IgD | - | - |
IgA | + | + |
IgA1, IgA2 | + | + |
IgE | +++ | +++ |
Fab | + | + |
ScFv | + | + |
Mouse | Total IgG | +++++ | +++++ |
IgM | - | - |
IgG1 | +++ | + |
IgG2a | +++ | +++ |
IgG2b | +++ | +++ |
IgG3 | +++ | +++++ |
Rat | Total IgG | +++ | + |
IgG 1 | +++ | +++ |
IgG2a | +++++ | +++ |
IgG2b | + | +++ |
IgG2c | +++++ | +++ |
Cow | Total IgG | +++++ | + |
IgG1 | +++++ | + |
IgG2 | +++++ | +++++ |
Goat | Total IgG | +++++ | + |
IgG1 | +++++ | + |
IgG2 | +++++ | +++++ |
Sheep | Total IgG | +++++ | + |
IgG1 | +++++ | + |
IgG2 | +++++ | +++++ |
Horse | Total IgG | +++++ | + |
IgG(ab), IgG(c) | + | - |
IgG(T) | +++++ | + |
Rabbit | Total IgG | +++++ | +++++ |
Guinea pig | Total IgG | +++++ | +++++ |
Hamster | Total IgG | +++ | +++ |
Pig | Total IgG | +++++ | +++++ |
Donkey | Total IgG | +++++ | +++ |
Cat | Total IgG | +++++ | +++++ |
Dog | Total IgG | +++++ | +++++ |
Monkey | Total IgG | +++++ | +++++ |
Chicken | Total IgG | - | - |
Notes: “+”= weak binding, “+++”=medium binding, “+++++”=strong binding, “-”=no binding
资料下载
Protein A/G免疫沉淀磁珠说明手册 |
MSDS